唾液淀粉酶最适pH值的测定
对照组。
表2 实验组和空白对照组设置表
用量（mL）
实验组 1 2 3 空白对照
7.0 pH缓冲液 0.9 0.9 0.9 0.9
2.5 g/L淀粉 0.1 0.2 0.3 —
唾液（稀释10倍） 0.1 0.1 0.1 0.1
H2O 5.9 5.8 5.7 6
混匀，37℃水浴7.5 min，然后向每管加2滴碘液。
混匀，观察现象看出，0.3 mL 2.5 g/L淀粉溶液颜色反应最浅，选择该管做下一步实验。
（四）酶液稀释倍数的确定
如下配制酶的稀释液。
表3a 酶液稀释倍数
稀释倍数 5 10 15 20 25 30
酶液（mL） 1 0.5 0.4 0.25 0.2 0.2
H2O（mL） 4 4.5 5.6 4.75 4.8 5.8
通过实验得到的酶液稀释对照结果如下表：
表3b 酶液稀释对照表
稀释倍数 5 10 15 20 25 30 空白
7.0 pH缓冲液 0.9 0.9 0.9 0.9 0.9 0.9 0.9
2.5 g/L淀粉（mL） 0.3 0.3 0.3 0.3 0.3 0.3 0.3
唾液 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1 —
H2O 6 6 6 6 6 6 6
混匀，37℃水浴7.5 min，然后向每管加2滴碘液。
混匀，观察到稀释5倍的1号管颜色最浅，为最适管。
（五）最适pH的确定
实验过程及其记录如下表：
用量（mL）
pH 6.0 6.2 6.4 6.6 6.8 7.0 7.2
pH缓冲液 0.9 0.9 0.9 0.9 0.9 0.9 0.9
2.5 g/L淀粉 0.3 0.3 0.3 0.3 0.3 0.3 0.3
某倍数唾液（5倍） 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1
混匀，37℃水浴7.5 min，然后向每管加2滴碘液
H2O 6 6 6 6 6 6 6
A660 0.336 0.257 0.192 0.309 0.354 0.371 0.402
混匀，用蒸馏水调零，测定A660。
以A660为纵坐标，pH为横坐标作图，得出如下结果：
二、实验结果
由以上实验过程可以得出，唾液淀粉酶的最适pH为6.4。
三、讨论
唾液的pH一般为6.6～7.1，唾液淀粉酶的最适pH约为6.8。在这次实验中产生误差的可能原因为：（1）制备酶时存在一些不足。直接漱口获得酶的方法对酶浓度的影响较大;每个人因为个体差异，其唾液淀粉酶对酸碱度的适应程度不同。（2）实验设置不理想。固定的缓冲液配置不够精确;水浴保温时间和反应时间不一致。另外，实验中碘液的浓度也直接关系到对实验结果的准确观察，若实验中配制的碘液浓度高，其颜色将实际反应的颜色遮蔽，对淀粉用量和淀粉稀释倍数的判定容易造成影响，使实验结果不能准确地观察得到。酶活性受pH的影响，在37℃时，最适pH为6.4，接近中性，与口腔的环境相似，所以唾液淀粉酶在人体口腔内有较好的初步消化淀粉的作用。
【参考文献】
[1]许冰，袁媛，赵文献.pH值对酶活性影响的实验观察[J].临床合理用药，2010.（10）
[2]吴耀生.医学生物化学与分子生物学实验指南[M].北京：人民卫生出版社，2007
[3]尚渤程，黎一苇.人体常见pH值[J].生物学教学，2009（12）