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陕西省食品微生物致病菌沙门氏菌的测定能力验证结果分析

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计划组织实施了本次活动,现对本次能力验证结果进行分析。沙门氏菌是肠杆菌科中的重要菌属,与人类健康和食品安全的发展关系密切[2],本文为研究陕西省相关实验室沙门氏菌能力验证现状提供参考。

1 材料与方法

1.1 主要仪器和试剂

VITEK 2.0全自动生化鉴定系统,法国生物梅里埃公司;SPX-250B-Z生化培养箱,上海博迅实业有限公司医疗设备厂;ModulyoD冷冻干燥机,美国热电公司。营养琼脂、缓冲蛋白水、四硫磺酸钠煌绿增菌液、亚硒酸盐胱氨酸增菌液、亚硫酸铋琼脂、木糖懒氨酸脱氧胆盐、沙门氏菌显色培养基、三糖体琼脂、赖氨酸脱羧酶生化鉴定管均购自北京陆桥技术有限责任公司;沙门氏菌属诊断血清购自兰州生物制品研究所有限责任公司;沙门氏菌标准菌株及弗式柠檬酸杆菌杆菌购自ATCC。

1.2 样品制备及发放

1.2.1 样品制备

安瓿管用2%盐酸浸泡过夜,自来水冲洗干净后,用蒸馏水浸泡至pH中性,干燥后、贴上标签,标上菌号及时间,加入脱脂棉塞后,121℃灭菌20min备用;无抗脱脂乳粉按比例加入纯水复原,分装于三角瓶中,110℃灭菌15min备用;菌液分为阳性混业液和阴性菌液,经离心,菌体和复原乳粉混合。每个安瓿管分装500μL,瓶口用无菌脱脂棉塞住;分装完后,迅速放置-20℃以下预冷2h,将冷冻后的样品安瓿置于冷冻干燥机的干燥箱内,开始冷冻干燥8小时,至完全干燥成粉末状;将安瓿管颈部用强火焰拉细,然后采用真空泵抽真空,在真空条件下将安瓿管颈部加热熔封;4℃或-20℃低温避光保存;冷冻干燥后抽取若干支安瓿管进行质控检测,保证样品稳定性和均匀性良好。

1.2.2 样品发放

本次分配检测实验室唯一编号,现场领取,随机发放阴阳性测试盲样。

1.3 检测方法

推荐方法:GB 4789.1-2010《食品安全国家标准 食品微生物学检验总则》[3];GB 4789.4-2010《食品安全国家标准食品微生物学检验沙门氏菌检验》[4]。

1.4 评价方法

本次能力验证所涉及项目为定性分析,对检测结果以“检出”或“未检出”描述。沙门氏菌应按标准检测程序检测,需在原始记录中详细描述生化鉴定及血清学鉴定结果。

统计分析时,根据各实验室提交检测结果,并结合原始记录与所制盲样中实际包含致病菌种类是否一致进行判定,最终判定结果以“满意”和“不满意”表述。

2 结果统计及分析

本次能力报名企事业单位共62家,共收回有效能力验证结果报告单62份,对沙门氏菌检测结果评价为满意的有61家实验室,有1家企业实验室判定结果为不满意。

2.1 检测结果满意度评价

从图1可以看出,质检部门参试单位15家,检测结果满意度为100%;食药部门参试单位8家,结果满意度为100%;疾控部门参试单位35家,满意度为100%;因其它性质参试单位仅有4家,在此不做满意度评价。可知政府机构所属实验室对于沙门氏菌检测能力总体评价为全部满意。

2.2 参试实验室分布

检测实验室省内分布如图2所示,省级单位5家(质检4家、食药1家);西安市13家单位(质检1家、疾控11家、食药1家);渭南市4家单位(质检2家、疾控2家);咸阳市8家单位(质检1家、疾控7家);宝鸡市4家单位(质检1家、疾控2家、食药1家);安康市4家单位(质检1家、疾控2家、食药1家);汉中市7家单位(质检1家、疾控4家、食药2家);商洛市3家单位(质检1家、疾控1家、食药1家);延安市4家单位(质检1家;疾控3家);榆林市3家单位(质检1家、疾控2家);铜川市2家单位(质检1家、疾控1家);杨凌区质检1家单位参加;其他类型事业单位2家;检测公司2家。共计62家企事业单位。综上可知,本次能力验证参试实验室覆盖率良好。

2.3 参试实验室报告评价

检测报告及原始记录内容完善的有15家单位;检测报告原始记录描述简单的有13家单位;血清学鉴定规范的有24家单位;通过试剂盒或生化鉴定仪确认可疑菌落的单位有18家。原始记录为溯源性的依据,应该加强这方面的记录意识。依据生化鉴定和血清学综合确定检出结果是很有必要的。随着科技的发展,全自动生化鉴定仪和试剂盒也逐渐被广泛的应用到日常的检测活动中,这在一定程度上,缩短了生化鉴定时长,提高了检测效率。

3 讨论

近几年来,陕西省食品安全检测实验室检测能力不断加强,布局也逐步合理,疾控系统、质检系统和食药系统检测实验室相互交叉,能更好的发现和应对食品安全突发事件。省、市、县均有能力进行沙门氏菌的检测,截止今年,具有省质监局颁发资质的有58家政府单位实验室,并且在本次能力验证中评价结果全为满意。

实验室的能力验证是利用实验室间比对确定实验室检测能力。通过开展此类能力验证活动,帮助各实验室人员尽可能发现检测中存在的问题,不断提高实验室的沙门氏菌检测水平。

我省每年开展的食品中致病菌能力验证工作是参照国家食药总局的方案,结合本省的实际情况进行考评。在进行实际评价中,结果未达到满意的实验室,可以申请一次补测,补测不过的,取消其对于该项目的检测资质。这种评价方案可以逐步提高各实验室对于沙门氏菌等食品中致病微生物的检测能力。

本年度沙门氏菌检测能力评价达到了活动的目的,共有62家参试单位,满意度达到98.39%,真实反映了陕西省各机构实验室对于沙门氏菌检测的水平和能力。统计结果也为相关管理部门提供了参考依据。

参考文献

[1]中国合格评定国家认可委员会.CNAS RL02: 2011 《能力验证规则》[S]2011.

[2]张燕,朱超.我国沙门氏菌病和菌型分布概况[J].现代预防医学, 2002, 29(3):400-401.

[3]食品安全国家标准.食品微生物学检验.总则 GB 4789.1-2010.

[4]食品安全国家标准.食品微生物学检验.沙门氏菌检验 GB 4789.4-2010.

推荐访问:沙门氏菌 陕西省 致病菌 微生物 测定

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