血培养仪阳性病原菌报警时间在临床早期用药中的应用价值

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【摘要】 目的 探讨血培养仪阳性病原菌报警时间在临床早期用药中的应用价值。

方法 采用回顾性调查分析，收集2015年6～12月住院及門诊患者送检的血培养阳性标本，统计分析不同病原菌阳性报警时间。

结果 不同菌属病原菌在血培养仪报警时间中位数不同，报警速度从快到慢中位数依次是链球菌属（11.8 h）<非发酵菌（12.2 h）<肠杆菌科（13.5 h）<肠球菌属（15.8 h）<葡萄球菌属（21.3 h）<阳性杆菌（30.5 h）<厌氧菌（32.6 h）<真菌（46.3 h），且与肠杆菌科（中位数）比较，有统计学意义的菌属是真菌（P<0.001）、阳性杆菌（P=0.001）、葡萄球菌（P=0.007）、厌氧菌（P=0.037），无统计学意义的是肠球菌属（P=0.702）、非发酵菌（P=0.845）、链球菌属（P=0.859）。

结论 不同病原菌菌属在血培养仪中报警时间存在差异，依据该特点，结合报阳曲线或涂片染色，可初步推断血流感染病原菌菌属，为临床早期合理用药提供初步依据。

【关键词】 血培养；报警时间；病原菌

中图分类号：R446.5 文献标识码：A DOI：10.3969/j.issn.1003-1383.2017.03.010

【Abstract】 Objective To investigate the application value of alarming time of positive pathogens in blood culture instrument in clinical early medication.

Methods A retrospective investigation and analysis was carried out on the positive samples of blood culture of inpatients and outpatients collected from June to December，2015，and the alarming time of different positive pathogens was analyzed statistically.

Results The median of alarming time of different bacterial pathogens in blood culture instrument was different，the median of alarm speed from fast to slow followed by streptococcus （11.8 h）

Conclusion Different pathogenic bacteria species differ in alarming time in blood culture instrument.According to this characteristics，and combing with the Yang curve or smear staining，it can preliminarily infer the pathogenic bacteria of bloodstream infection， and provide the primary basis for the rational use of drugs in the early stage.

【Key words】 blood culture；alarming time；pathogens

血流感染是一种严重的全身性疾病，可对机体造成损害，严重者可导致休克、多器官功能衰竭、弥散性血管内凝血，甚至死亡，其感染的病原体包括细菌、真菌、病毒等[1]。近年来，由于静脉导管留置、机械通气、肠外给药等侵入性设备及治疗的应用，以及免疫抑制剂及大量抗生素的滥用[2～5]，血流感染的发病率逐年上升，美国资料显示血流感染每年约250 000例，每年约导致90 000例患者死亡[1]。而国内有关报道提示，四年来血流感染发病率逐年上升，住院患者中，血液科和感染科患者血流感染的年发病率分别达500/100 000和200/100 000[1]。由此可见，血流感染发病率及死亡率呈全球性的增长，在血流感染如此严峻的状况下，若实验室能在第一时间获得病原菌，对于挽救患者生命至关重要。所以实验室工作人员在工作中有必要研究血培养报阳时间，为及早指导临床用药提供依据，为挽救患者生命抢得最佳时机。

1 材料与方法

1.1 标本来源

收集我院2015年6～12月临床住院及门诊患者送检的2886个血培养瓶，报警阳性瓶327个，分离菌株249株（去除同一病人相同菌株，大于三種及2种凝固酶阴性葡萄球菌报警的阳性瓶）。

1.2 仪器

法国生物梅里埃诊断产品有限公司生产的Bact/Alert 3D 120全自动血培养仪、VITEK2-compact全自动微生物鉴定药敏分析仪、DensiCHEK-plus比浊仪、PREVI-Color Gram全自动革兰染色仪，长沙湘锐离心机有限公司生产的细胞涂片离心机，长沙长锦科技有限公司生产的CP-ST50ACO2培养箱。

1.3 试剂

法国生物梅里埃诊断产品有限公司生产的需氧培养瓶、厌氧和兼性厌氧培养瓶、儿童培养瓶、革兰氏阳性细菌鉴定卡、革兰氏阳性细菌药敏卡、革兰氏阴性细菌鉴定卡、革兰氏阴性细菌药敏卡、酵母菌鉴定卡，奈瑟菌及嗜血杆菌鉴定卡、哥伦比亚血琼脂培养基、巧克力琼脂培养基、麦康凯琼脂培养基、沙保氏葡萄糖琼脂培养基，革兰氏染色试剂。

1.4 方法

1.4.1 标本的采集与培养

依据M47-A血培养的原则和规程（批准指南）、第四版全国临床检验操作规程中血液及骨髓标本操作要求、法国生物梅里埃诊断产品有限公司生产的需氧培养瓶、厌氧和兼性厌氧培养瓶、儿童培养瓶配套说明书要求，对成人采集5～10 ml注入需氧和厌氧瓶，儿童采集1～4 ml注入儿童瓶，实验室收到标本后立即放入血培养仪进行孵育。

1.4.2 阳性瓶的处理 Bact/Alert 3D 120全自动血培养仪提示血培养瓶阳性报警后，首先查看报阳时间及曲线，然后转种血平板、巧克力及麦康凯平板，最后从阳性瓶中吸取1 ml直接涂片，待其干燥后革兰染色，依据革兰染色涂片结果及报阳时间发出一级报告。转种后的标本经培养后根据菌落形态及染色结果调取菌悬液浓度，选择合适鉴定及药敏卡上VITEK2-compact全自动微生物鉴定药敏分析仪，得出结果，最终发出三级报告。

1.5 统计学方法

采用SPSS 16.0软件进行统计学分析，运用非参数的Wilcoxon秩和检验比较阳性报警时间，显著性水平检验标准：α=0.05。

2 结 果

2.1 血培养报阳病原菌分布

249株报阳标本，病原菌分布及构成比见表1。

2.2 血培养报警阳性不同病原菌报警时间比较 在249株阳性标本中，不同病原菌菌属阳性报警时间见表2。

报告分布基本一致[1，3，5]。临床实践中依据这一血流感染病原病菌分布结果，临床医生再结合其患者原发病灶、免疫功能状况、发病场所及其他流行病学资料综合考虑其可能的病原菌，可尽早开始经验性抗菌药物的治疗。在本研究实验中，从表2可以看出各病原菌血培养报警时间中位数不同，报警速度从快到慢依次是链球菌属（11.8 h）<非发酵菌（12.2 h）<肠杆菌科（13.5 h）<肠球菌属（15.8 h）<葡萄球菌属（21.3 h）<阳性杆菌（30.5 h）<厌氧菌（32.6 h）<真菌（46.3 h），与国内相关文献报道略有差异[8～13]，其差异主要体现在链球菌及非发酵菌报阳时间中位数小于肠杆菌科细菌，因其理论上肠杆菌科细菌大多对营养条件要求不高，生长速度较快，产生CO2的量较大，报警时间较早[8～10]，而链球菌多数为兼性厌氧，少数为专性厌氧，营养要求高，普通培养基不易生长，对糖分解能力不定[8～12]，理论上在培养基中生长速度变慢，CO2产生量少，所以链球菌的阳性报警时间较长。但在本研究实验中出现差异，原因可能是病原菌除与其生长代谢状况有关外，还与其他多种因素有关，如血标本中细菌浓度、抗生素使用、采样时间和采血量等[10]。在本实验中，因其理论上肠杆菌科细菌报阳时间较短，所以其他菌属选择与肠杆菌科（中位数）比较，从表2中看出，报阳时间有统计学意义的是真菌（P<0.001）、阳性杆菌（P=0.001）、葡萄球菌（P=0.007）、厌氧菌（P=0.037），无统计学意义的是肠球菌属（P=0.702）、非发酵菌（P=0.845）、链球菌属（P=0.859）。在其临床实践中，实验室工作人员可依据各菌属报阳时间存在的一些差异，结合细菌生长曲线，或结合其涂片染色结果判断其所属菌属尽快报告临床，及早指导临床医生合理选择抗菌药物。

本实验研究中，从表2中我们还能得出更多的有效实验结论，即病原菌报阳时间在12小时内占27.3%，在24小时内报阳的占69.07%，在48小时内报阳的占86.74%，在72小时内报阳的占92.77%，在96小时内报阳可达96.39%，微生物室工作人员也可依据其不同报阳时间段和细菌生长曲线初步判断仪器阳性报警是真阳性报警还是假阳性报警。我们在实际工作中遇到一些假阳性报警，或直接涂片有细菌，但常规转种有些细菌生长较慢或不长，如苛养菌、真菌、阳性杆菌或厌氧菌等，结合其报阳时间，我们能很好判断下一步的可能处理措施，尽快向临床报告可能感染的病原菌，及早指导临床医生合理使用抗生素。

综上所述，由于不同病原菌菌属在血培养仪器中报警时间存在差异，实验室工作人员可根据阳性报警时间，结合报阳曲线或涂片染色，尽快报告临床，及早指导临床合理用药。实验室工作人员还可依据其不同报阳时间段初步判断仪器阳性报警是真阳性还是假阳性，因此，实验工作中关注不同病原菌在血培养仪中报警时间起着至关重要的作用。

参 考 文 献

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（收稿日期：2016-12-10 修回日期：2017-04-10）

（编辑：潘明志）

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