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中药鉴定方法的新进展

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[摘要] 现代自然科学技术在中药领域的应用, 使中药鉴别和质量评价更加准确、有效,并推动其向标准化、高速化、信息化等方向发展,成为了多学科的汇集点,本文对应用于中药鉴定的主要现代方法综述如下。

[关键词] 中药;鉴定方法

[中图分类号]R282.5[文献标识码]A [文章编号]1673-7210(2007)07(c)-006-01

中药是中国传统医学的瑰宝,但由于品种繁多,发挥疗效通过多成分、多层次、多靶点和多途径综合作用于人体,且每种药材存在成分复杂、质量不稳定、难以定性定量分析和有效成分不确定等缺点,极大限制了中药在临床上的应用。为了控制中药质量、保证临床用药安全和有效,中药鉴定成为中医药研究的首要工作

1 组织形态鉴定法

常用的方法有显微化学反应观察、物理常数、微量升华、荧光分析、光谱法及色谱法等[1]。夏春丽等[2]根据中药材水浸后产生各种特殊的变化,利用中药材所含有的某些成分可在紫外光或可见光下产生一定颜色的荧光,确定了几十种中药材的真伪优劣。王凤玲等[3]也使用红外光谱法成功鉴定了栽培与野生丹参。

2 蛋白电泳法

中药多是动植物药,细胞中含有受遗传基因控制的蛋白分子。将被分离物质置于一定的支持物上,在外加

电场作用下,不同蛋白质分子的大小、形状、荷电性质不同,向电极泳动的方向和速度就不同,从而达到分离和鉴定被测物的目的。其中高效毛细管电泳(HPCE)是近年发展起来的新技术,具有高效、快速、样本体积小和分析范围广阔等优点。王德先[4]用此技术较容易的鉴别了天麻及其4种伪品。该方法也适于氨基酸 、蛋白质、生物碱及动物类药材的鉴别。

3 指纹图谱法

中药指纹图谱技术[5]是指某中药材或中成药中所共有的,具有特征性的某类或几种成分的色谱或光谱的图谱。即用一定的方法(如HPLC、GC、TLC、HPLC-MS、GC-MS、FTIR、X-ray和UV等),对特定的对象 (如中药材、提取物、饮片、注射液等)和过程进行分析,得到的有特征性的相对稳定的图谱。其最大的特点就是通过指纹图谱的特征性,有效鉴别样品的真伪。目前使用最多的中药化学指纹图谱是采用 HPLC法[6],可提供大量的信息,符合中药复杂体系研究的需要。

4 免疫法

不同的动植物药材含有不同的特异蛋白,免疫鉴别即利用该蛋白制备的特异抗体与待检品中的特异抗原结合产生沉淀反应来鉴别药材的真伪。该技术适用于动物药材的鉴别,尤其是亲缘关系比较接近的动物药间的鉴别[7]。国内学者[8]采用免疫电泳法及琼脂免疫扩散法准确鉴定了虎、豹等多种动物的骨骼,还能将豹骨进一步鉴定为雪豹、石豹或金钱豹,说明免疫鉴别方法是一种特异性很强的鉴别法。

5 分子生物学技术

传统的中药鉴别主要依据形态学特征和理化性质,但是最具有决定意义的应该是 DNA鉴定。DNA是物种的遗传物质,物种的差异归根结底是由于它们 DNA之间的核酸序列不同。中药的 DNA鉴定,通过对中药品种基因组的直接分析,不仅有助于正本清源,而且对于建立我国名贵中药材的基因库,了解这些品种的遗传变迁状况及代用品间血缘关系都有重大意义。可应用于药用植物鉴别的分子生物学方法主要有:限制性片段长度多态性(RFLP)、随机扩增多态性 DNA(RAPD)、扩增片段长度多态性 (AFLP)、随机引物PCR(AP-PCR)、DNA指纹技术(DAF)和生物芯片等技术[9]。

综上所述,现代中药鉴定学发展的目标是:建立包括基因组成特征、基因差异表达、化学组成和含量、植物形态、临床疗效等多层面的中药鉴定学科体系,同时通过这种学科体系建设,为寻找和扩大新药源提供可靠的指导资料。除文中所述主要方法外,电化学分析、原子吸收光谱、等离子体光谱、X射线荧光光谱、同功酶分析和mRNA差异显示等方法[10]也可用于中药鉴定。这些新技术的运用将逐步引导中药鉴定向标准化、高速化、信息化发展。

[参考文献]

[1]苑冬敏,康廷国. 中药显微鉴定研究方法探析[J]. 辽宁中医学院学报,2004,6(1):67-68.

[2]夏春丽,朱新元. 常见中药材的吸试法及荧光鉴别法[J]. 陕西中医,2006,27(11):1424-1425.

[3]王凤玲,周建科,吴婧,等. 栽培与野生丹参的红外光谱三级鉴定研究[J]. 现代仪器杂志,2006,12(5):18.

[4]王德先.天麻及其伪品的毛细管电泳鉴别及天麻素的测定[J].中草药,2001,32(4):351-352.

[5]王睿,徐伟,方翼,等. 中药指纹图谱研究进展[J]. 中国药师,2004,7(10):764-767.

[6]路飚,彭咏梅. HPLC法测定心脑健滴丸中儿茶素和表儿茶素的含量[J].湖南中医杂志,2007, 23 (1):78-78,83.

[7]杨洪鸣,李真玉,唐金宝. 现代生物技术在中药鉴定中的应用[J]. 中国药师,2004,7 (10):811-812.

[8]向金莲,张榕. 现代分析技术在中药鉴定中的应用[J].华西药学杂志, 2001,16(3):204-206.

[9]曹秀明,郑蔚虹,尚明. DNA分子标记技术在龙胆鉴别与亲缘关系划分上的应用[J].中华中医药学刊,2007,25(4):829-830.

[10]方和桂. 基因技术在中药鉴定中的应用[J]. 中草药,2006,37(2):315-316.

(收稿日期:2007-06-14)

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